تولید آزمایشگاهی فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب و ارزیابی عملکرد آن در بقای سلولی

Authors

سارا پورانوری

sara pouranvari ph.d in molecular genetics, department of biology, islamic azad university, science and research branch, tehran, iranphd رشته ژنتیک مولکولی، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران فیروز ابراهیمی

firouz ebrahimi assistant professor, faculty of basic sciences, biology research center, imam hussein university, tehran, iranتهران: اتوبان شهید بابایی، دانشگاه امام حسین (ع)، گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی تهران: اتوبان شهید بابایی، دانشگاه امام حسین (ع)، گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی غلامرضا جوادی

gholamreza javadi associate professor, department of biology, islamic azad university, science and research branch, tehran, iranدانشیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران بزرگمهر مداح

bozorgmehr maddah associate professor, department of chemistry, faculty of basic sciences, imam hussein university, tehran, iran. دانشیار، گروه شیمی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین (ع)، تهران، ایران

abstract

سابقه و هدف: فاکتور رشد اپیدرم انسانی (hegf)، پلی پپتیدی دارای 53 اسید آمینه است که کاربردهای وسیعی در پزشکی و به ویژه ترمیم زخم دارد. هدف از این پژوهش، همسانه سازی، بیان و تخلیص hegf نوترکیب و بررسی اثر میتوژنیک آن بر دودمان سلولی nih3t3 بود. مواد و روش ها: زیرهمسانه سازی ژن hegf، درون وکتور pet24a صورت گرفت. بیان پروتئین تحت شرایط استاندارد صورت گرفت. از آن جایی که بیان پروتئین به صورت کنجاله های نامحلول بود، محلول سازی ملایم با استفاده از بافری با ph قلیایی صورت گرفت. در نهایت و پس از ایجاد تاخوردگی مجدد، اثر میتوژنیک این پروتئین در غلظت های مختلف بر دودمان سلول nih3t3مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: محلول سازی ملایم کنجاله های نامحلول با بافر قلیایی و پس از آن انجام تاخوردگی مجدد دارای بازده بسیار بالایی بود. نتایج آزمون mtt، نشان داد که سلول های تیمار شده با فاکتور رشد اپیدرمی بیان شده در این تحقیق، پس از گذشت 72 ساعت، به طور معنی داری درصد بقاء بیش تری نسبت به کنترل (0001/0< p). نشان دادند. استنتاج: به نظر می رسد که سیستم بیان سیتوپلاسمی به کار برده شده در این تحقیق، برای تولید فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب زیست فعال کارامد باشد. روش ارائه شده در این تحقیق، روشی آسان، در دسترس، مقرون به صرفه و با بازده بالا برای محلول سازی کنجاله های نامحلول و به دست آوردن شکل زیست فعال فاکتور رشد اپیدرم انسانی می باشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بیان نوترکیب فاکتور رشد اپیدرم انسانی در باکتری E. coli و ارزیابی اثر آن بر دودمان سلولی NIH-3T3

خانواده EGF شامل 13 عضو می باشد و فاکتور رشد اپیدرم انسانی یکی از اعضای این خانواده شناخته شده که در ترمیم زخم های اپیدرم پوستی ایفای نقش می کند. این فاکتور، یک پلی پپتید اساسی برای ترمیم زخم و آغاز تقسیم میتوزی است. در این مطالعه، ژن فاکتور رشد اپیدرم انسانی از بانک ژنی استخراج و پس از بهینه سازی کدون‌های آن براساس ترجیح کدونی باکتریE. coli در وکتور pET21a(+) سنتز گردید. وکتور حامل ژن مذکور به...

full text

بیان نوترکیب فاکتور رشد اپیدرم انسانی در باکتری e. coli و ارزیابی اثر آن بر دودمان سلولی nih-۳t۳

خانواده egf شامل 13 عضو می باشد و فاکتور رشد اپیدرم انسانی یکی از اعضای این خانواده شناخته شده که در ترمیم زخم های اپیدرم پوستی ایفای نقش می کند. این فاکتور، یک پلی پپتید اساسی برای ترمیم زخم و آغاز تقسیم میتوزی است. در این مطالعه، ژن فاکتور رشد اپیدرم انسانی از بانک ژنی استخراج و پس از بهینه سازی کدون های آن براساس ترجیح کدونی باکتریe. coli در وکتور pet21a(+) سنتز گردید. وکتور حامل ژن مذکور به...

full text

فاکتور رشد عصب، کاربرد بالینی و تولید پروتئین نوترکیب

پروتئین­های خانواده نوروتروفین در پستانداران شامل فاکتور رشد عصب (NGF)، فاکتور نوروتروفیک مشتق از مغز (BDNF)، نوروتروفین-3 (NT-3) و نوروتروفین-4/5 (NT-4/5) هستند که به­عنوان فاکتورهای بقای سلول­های عصبی شناخته شده­اند. فاکتور رشد عصب یکی از مهم­ترین سیتوکین­هاست که از 118 اسید آمینه تشکیل شده است. این فاکتور در رشد و تمایز سلول­های عصبی سمپاتیک محیطی مهره­داران و نورون­های کولینرژیک بازال قدامی...

full text

افزایش تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سلول‌های CHO از طریق کنترل شرایط کشت سلولی

هدف: هدف این مطالعه افزایش تولید هورمون رشد انسانی توسط اضافه کردن ترکیبات شیمیایی به محیط کشت فاقد سرم سلول‌های CHO و بررسی خواص hGH تولید شده می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، تاثیر تیمارهای مختلف شامل غلظت‌های مختلف گلیسرول،DMSO ، NaBu و ZnSO4 در سلول‌های CHO مورد بررسی قرار گرفت و تولید GH به‏روش الایزا سنجیده شد.سلول‌ها به هر چاهک یک پلیت 12 خانه حاوی DMEM-F12 و FBS10 درصد اضافه شدند...

full text

جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO

جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره‌باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور VII ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد....

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران

جلد ۲۵، شماره ۱۲۵، صفحات ۱۰-۲۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023